成功克隆的馬爾濟斯幼犬。青島農業大學供圖
一直以來,犬類克隆被認為是體細胞克隆方面的技術高地。以往犬類克隆一直依賴體內成熟的卵子,而且犬科動物缺少高效同期發情和體外成熟體系,可用的卵子數量較少,直接導致犬類體細胞克隆效率降低。同時,犬科動物細胞質中脂肪較多,細胞質呈黑色,細胞核不可見,導致細胞核去除效率降低,進一步限制了克隆犬的生產效率和技術推廣。
該團隊通過多年研究,成功將AI視覺識別技術與顯微操作技術融合,利用將卵母細胞細胞核位置的特征信息成功提取出來并用于機器學習,最終得到能夠成功預測犬卵母細胞細胞核位置的人工視覺模型。實驗證實,該模型可在數十毫秒內完成卵母細胞細胞核的位置預測。
該團隊將模型與虛擬現實技術結合,將預測的細胞核位置投射到顯微鏡目鏡上,使操作人員能夠更加精準進行卵母細胞去核操作,極大提高了犬科動物的克隆效率。此次克隆共制備體細胞核移植胚胎67枚,移植到6只受體犬中,最終3只成功妊娠,并順利誕下2只幼犬。
據介紹,趙明輝團隊長期致力于哺乳動物體細胞克隆研究。自2016年首次成功實現犬體細胞克隆以來,該團隊先后開發出高效的犬早期胚胎體外培養體系、犬排卵預測方法、貓科動物無創胚胎移植技術、貓基因編輯技術等胚胎操作基本技術方法,成功實現貓、豬體細胞克隆全流程“國產化”。